梅里埃VITEK 芽胞菌鉴定卡(BCL)为完整的全自动细菌鉴定和药敏分析系统,细菌鉴定采用生化反应数码鉴定原理。可以以较少的实验人员及较短的准备和处理时间,提供准确的测定结果。数据库应涵盖革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、芽胞菌、酵母菌、奈瑟氏菌及嗜血杆菌、厌氧菌;必须有生物菌的鉴定能力(鼠疫杆菌、霍乱弧菌、吐拉菌等)。
梅里埃VITEK 芽胞菌鉴定卡(BCL)方法:
1. 菌株分离与鉴定: 将可疑标本接种于SBA 和Choc-V 琼脂平板上, 置5 %CO2 孵箱, 35 ℃培养24 ~72 h 观察结果。细菌的分离培养和鉴定按文献进行, 分离到的菌株经涂片革兰染色镜检、触酶、氧化酶试验后, 用VITEK-(NHI 和GNI)鉴定试卡鉴定到种。
2. 氧化酶试验。
3. DNA 酶试验。
4. 乙酰酯酶试验:用无菌生理盐水将3-乙酰吲哚纸片沾湿, 取待检菌落涂在纸片上, 3 min 内出现蓝绿色为阳性反应。以MC 的ATCC 25238 , 全国临床检验中心质控菌株9602 , 9707 , 0101 作为阳性对照。
5. 生长指数(GI)测定: 取经Rchoc 平板24 h 培养的卡他莫拉菌ATCC 25238 菌落于2 ml 无菌盐水中, 制成0.5 麦氏单位菌悬液, 再用无菌盐水进行1 :10 连续稀释, 取10-5 、10-6 、10-7稀释度菌液100 μl分别接种在9 种培养基上(Rchoc 、Schoc 、Choc-V 、SBA 、MHA 、MHB 、BCA 、NUA 、ZLA), 分别置普通孵箱和5 %CO2 孵箱各1 套, 于35 ℃孵育24 、48 、72 、96 h ,计数少于10 个菌落平板上的菌落数, 并用游标卡尺量出菌落直径, 求其均值(mm), 再乘以此稀释度的对数即得GI。